11ª PRÁCTICA

18/02/2020
PRÁCTICA Nº11: "SIEMBRA DE MICROORGANISMOS EN ANAEROBIOSIS"

OBJETIVO

• Comprobar el crecimiento de microorganismos presentes en la cavidad bucal y nasal.

MATERIAL NECESARIO

• Medios de cultivo: Agar Sangre y Agar Chocolate.
• Mechero Bunsen.
• Hisopos estériles.
• Cámara de anaerobiosis (cubeta de plástico con GENbox anaer).
• Asas de siembra estériles.
  
   

PROCEDIMIENTO

1. Con un hisopo estéril, tomar una muestra de la cavidad bucal. Para ello, pasar varias veces el hisopo por ésta para obtener una buena muestra.
   
2. Una vez obtenida la muestra, la sembramos por agotamiento de estrías en Agar Chocolate.
   
   
   
3. A continuación, tomar una muestra de la cavidad nasal con un hisopo estéril (al igual que la toma realizada anteriormente).
4. La sembramos por agotamiento de estrías en un medio de Agar Sangre.
   
   
   
5. Depositar ambas placas sembradas, en una cubeta de plástico (junto con todas las placas de los alumnos de la clase) e introducir una sustancia que consume el oxígeno. Cerrar herméticamente.
   
   
   
   
6. Incubar en estufa a 37ºC durante 24 horas.
   
   20/02/2020

TINCIÓN DE GRAM DE COLONIAS ANAEROBIAS

1. Depositar 1 gota de Solución Salina Fisiológica en un portaobjetos.
2. Coger con un asa de siembra estéril, colonias anaerobias de la cavidad bucal.
   
   
   
   
3. Homogeneizar con la Solución Salina Fisiológica.
   
4. Desecación de la extensión.
   
5. Fijación de la extensión pasando el porta 3 veces por la llama oxigenada del mechero Bunsen.
6. Hacer lo mismo con las colonias de microorganismos de la cavidad nasal.
   
   
   
   
   
7. Realizar la tinción de Gram a ambos portaobjetos.
   
   
   
   
8. Dejar secar los portaobjetos a temperatura ambiente.
   
9. Visualizar al microscopio óptico ambas extensiones.
10. Resultados.
    
    
    
    
    
    
    

SIEMBRA DE COLONIAS ANAEROBIAS EN UN MEDIO CHAPMAN

• Sembrar por agotamiento de estrías las colonias de microorganismos anaerobios procedentes de la cavidad nasal [cocos G (+)] en medio Chapman ("MANNITOL SALT AGAR").