4ª PRÁCTICA

23/01/2020
PRÁCTICA Nº4: "UROCULTIVO"

FUNDAMENTO
Una de las pruebas más solicitadas, en el laboratorio de análisis clínicos, es el urocultivo, cuya finalidad es detectar y cuantificar los microorganismos causantes de infección.
El diagnóstico microbiológico de una infección urinaria no es tarea fácil ya que hay que tener presente que, de manera natural, existen microorganismos en la porción distal de a uretra, región genital y periné que pueden contaminar la orina y multiplicarse en ella.
La etiología de la infecciones urinarias varía según que se hayan adquirido extra o intrahospitalariamente.
El tracto urinario aparece como un lugar idóneo para la proliferación de numerosos gérmenes, entre los que destacan las Enterobacterias, que constituyen el 35-40% de las infecciones hospitalarias. Dentro de éstas, E.coli es la que con mayor frecuencia se aísla.

MATERIAL NECESARIO

• Medio CLED.
• Mechero Bunsen.
• Asas de 1 microlitro (blancas).
• Medios CLED-Mc. Conkey en tubo (Laminocultivo).
• Medio CROM URINE.
• E.Coli en placa de Petri con XLD Agar.
• Muestras: Orina adulterada con Klebsiella y suero con 3 tipos diferentes de microorganismos para toda la clase.

PROCEDIMIENTO

1. En primer lugar, sembrar en la placa que contiene el medio CLED, la orina adulterada con Klebsiella. Para ello, utilizaremos un asa de 1 microlitro y sembraremos la muestra por el método de "Siembra-Aislamiento".
   Nota: En el extremo superior del medio, trazamos una línea vertical hasta la mitad de la placa y realizamos líneas horizontales muy juntas sobre ésta (siembra). Posteriormente, arrastar unas colonias de la zona sembrana hacia ambos extremos par aislamiento.
   
2. MEDIO M.Conkey: Sembrar la muestra de la orina adulterada con Klebsiella en el medio M.Conkey Agar con ayuda de un asa de siembra estéril normal y sembraremos por el método de "Agotamiento de estrías". Incubar a 37ºC durante 24 horas.
   
   
   
   
3. MEDIO CROM URINE: Sembrar E.Coli por agotamiento de estrías ayudándonos de un asa de siembre estéril desechable.
   
   
   
4. LAMINOCULTIVO: Sumergimos el laminocultivo en la muestra de orina con infección a examinar cubriendo el agar completamente y lo sacamos de inmediato. Posteriormente, debemos quitar el exceso de la muestra sobre un papel absorbente y cerrar el tubo. Incubar a 37ºC durante 24 horas.
   
   
   
5. Como ya hemos mencionado, incubar todos los medios sembrados en estufa a 37ºC durante 24 horas.

RESULTADOS (24/01/2020)

- Medio de CLED:

• E.Coli: Colonias Amarillas - Fermentan lactosa.
• Proteus: Incoloras o azules - No fermentan la lactosa.
• Klebsiella: Mucosas - Fermentan lactosa.
  

- Medio Mc. Conkey:

• Crecen bacterias G (-).
• Medio rosa oscuro: Fermenta lactosa.
• Medio y colonias rosas: Fermentador rápido.
• Medio marrón y colonias rosas: Fermentador lento.
• Medio marrón: No fermenta la lactosa.
• Medio y colonias marrones: No fermentador.
• Klebsiella: Fermentador lento. Medio marrón y colonias rosas.
  

- Medio cromogénico:

• E.Coli: Color granate.
  
   

RESULTADO LAMINOCULTIVO