6ª PRÁCTICA

04/02/2020
PRÁCTICA Nº6: "EXUDADO VAGINAL"

FUNDAMENTO
El exudado vaginal es remitido al laboratorio para el diagnóstico de vaginitis, una inflamación de la vagina, y vaginosis, una alteración del equilibrio de la flora vaginal sin inflamación. La infección vaginal es frecuentemente la causa de molestias en la mujer adulta y los síntomas de vaginitis son los síntomas de índole ginecológico que con más frecuencia ven ginecólogos y médicos de atención primaria. La vaginosis bacteriana es la causa más frecuente de consulta de la mujer por síntomas vaginales (40-50%), seguida por candidiasis (20-25%), y trichomoniasis (15-20%). La causa de vaginitis/ vaginosis no puede determinarse sólo sobre la base de los síntomas clínicos o el examen físico. Para realizar el diagnóstico correcto se requiere la evaluación microscópica del exudado vaginal. Los métodos de cultivo son menos útiles para el diagnóstico de algunas entidades vaginales.
La evaluación microscópica requiere evaluar tres características:

• Aspecto de las células epiteliales.
• Aspecto del germen dominante y/o morfología presente.
• Presencia o ausencia de leucocitos.

PROCEDIMIENTO
1º) SIEMBRA:

1. Coger una muestra de exudado vaginal con un hisopo estéril y realizar la siembra en diferentes medios de cultivo como pueden ser el medio Sabouraud, Müller Hinton y Chapman.
2. Para ello, realizar con el hisopo una línea vertical desde la parte superior de la placa hasta la mitad y extender hacia los lados el microorganismo.
3. A continuación, arrastrar un poco de la muestra hacia los lados inferiores de la placa para aislamiento.
4. Repetir el procedimiento en los distintos medios de cultivo.
   
   
   
   
   
   
   

2º) EXTENSIÓN Y TINCIÓN DE GRAM

1.  En un portaobjetos limpio y desengrasado, realizar una extensión con el hisopo directamente debido a que la muestra estaba recién cogida y se encontraba en exceso.
2. Realizar la desecación (situando el porta sobre unos 10 cm de la llama azul del mechero).
3. Fijar la muestra realizando 3 partes por la llama oxigenada del mechero. El porta no debe quemar al dorso de la mano. Esperar a que se enfríe.
   
4. Realizar una TINCIÓN SIMPLE para ello:

a) Situar el portaobjetos sobre unas paralelas colocadas encima de una cubeta de tinción. Cubrir la extensión con azul de metileno durante 2 minutos.

b) Enjuagar con agua destilada.

c) TINCIÓN DE GRAM:
d) Cubrir el porta con cristal violeta durante 1 minuto.

e) Enjuagar con agua destilada.

f) Depositar Lugol sobre el porta y dejarlo reposar durante 1 minuto.

g) Enjuagar con agua destilada.

h) Cubrir el porta con decolorante (alcohol-acetona) durante 15-20 segundos.

i) Enjuagar el exudado vaginal con agua destilada.
j) Depositar Safranina sobre el porta y dejar reposar sobre éste durante 1 minuto y 30 segundos.

RESULTADOS

• Tinción de Gram: Candida Albicans.